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監(jiān)測(cè)氧化應(yīng)激

氧化應(yīng)激被認(rèn)為與一系列疾病有關(guān)，臨床實(shí)驗(yàn)室的參數(shù)包括維生素 C、谷胱甘肽等。為了確定這些參數(shù)，我們提供了一系列 HPLC 分析。

所有 HPLC 檢測(cè)均經(jīng)過 CE-IVD 驗(yàn)證

檢測(cè)范圍涵蓋 ?-胡蘿卜素、Q10、GSH、丙二醛和維生素 C

還可提供維生素 C 的自動(dòng)檢測(cè)

HPLC 分析的分析概述

訂單號(hào)。       化驗(yàn)

標(biāo)本       測(cè)試次數(shù)       分析時(shí)間

特征

32000     ?-胡蘿卜素   血清/血漿      100  < 10 分鐘     快速簡(jiǎn)便的樣品制備

68000

輔酶Q10       血清/血漿

全血       100  14 分鐘  無液液萃取，無蒸發(fā)步驟

66000

谷胱甘肽       全血       100  5分鐘    檢測(cè)還原型和氧化型

67000

丙二醛    血清/血漿      100  < 5 分鐘 無干擾分析

65065

維生素C 血清/血漿      100  5分鐘    標(biāo)準(zhǔn)方法

65765/F

維生素C 血清/血漿      480  5分鐘    使用 96 孔濾板的自動(dòng)化方法

同型半胱氨酸

我們的 HPLC 分析可以簡(jiǎn)單而可靠地測(cè)定血清/血漿中的總同型半胱氨酸。樣品制備只是一個(gè)還原步驟，然后是沉淀和隨后的柱前衍生。

快速樣品制備

分析時(shí)間短

超過 2000 次運(yùn)行的色譜柱壽命

血清/血漿中同型半胱氨酸的分析

訂單號(hào)。       方法       測(cè)試次數(shù)       分析時(shí)間       特征

45000     高效液相色譜法    200   5.5 分鐘      適用于所有血液采集系統(tǒng)

3PLUS1® 多級(jí)血漿校準(zhǔn)器套裝抗抑郁藥 1/EXTENDED

訂貨號(hào)：92029/XT

參數(shù)：

西藍(lán)普蘭、去甲基、度洛西汀、氟沙明、米平、N-去甲基西普蘭、N-去甲基、N-去甲基舍曲林、O-去甲基舍曲林、

西酞普蘭

3PLUS1® Multilevel Plasma Calibrator Set Antidepressants 1/EXTENDED，凍干

相關(guān) MassTox® TDM 系列 A 參數(shù)集：抗抑郁藥 1/EXTENDED in Serum/Plasma (92913/XT)

這些來自 Chromsystems 的凍干校準(zhǔn)品基于人血漿，應(yīng)按照說明手冊(cè)使用。它們旨在校準(zhǔn)臨床診斷中的測(cè)量方法，以定量測(cè)定血清/血漿中的抗抑郁藥。在遵循說明的同時(shí)，校準(zhǔn)器的處理和測(cè)量方式應(yīng)與患者樣本相同。

這些校準(zhǔn)品僅作為具有 3 個(gè)不同濃度水平和 1 個(gè)空白值的多級(jí)校準(zhǔn)品組提供。

維生素 D 缺乏已被證明與貧血有關(guān)。循環(huán) 25(OH)D 由差向異構(gòu)和非差向異構(gòu)兩種形式組成。然而，差向異構(gòu)和非差向異構(gòu)維生素 D 在調(diào)節(jié)貧血和血紅蛋白水平方面的相對(duì)作用仍然未知。因此，在本研究中，我們檢查了維生素 D（包括其差向異構(gòu)體）對(duì)血紅蛋白水平的影響，獨(dú)立于其對(duì)循環(huán)高敏 C 反應(yīng)蛋白 (hsCRP) 的影響。這是一項(xiàng)對(duì)來自泰國發(fā)電局長(zhǎng)期隨訪隊(duì)列的 1655 名受試者的橫斷面研究。采集靜脈血測(cè)定維生素D[25(OH)D 2、25(OH)D 3、3'-epi-25(OH)D 2和3'-epi-25(OH)D 3]、血紅蛋白和 hsCRP 水平。數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差。年齡、性別和體重指數(shù) (BMI) 與循環(huán)血紅蛋白水平顯著相關(guān)，但未發(fā)現(xiàn)總血清 25(OH)D 與血紅蛋白水平之間存在關(guān)聯(lián)。然而，當(dāng)總 25(OH)D 分為 3'-表觀異構(gòu)體和非 3'-表觀異構(gòu)體形式時(shí)，3'-表觀-25(OH)D 與血紅蛋白水平顯著相關(guān)，與年齡、性別和 BMI 無關(guān)( P ?< 0.01)。未發(fā)現(xiàn)非 3'-epi-25(OH)D 與血紅蛋白之間存在關(guān)聯(lián)。當(dāng) hsCRP 添加到模型中時(shí)，3'-epi-25(OH)D 對(duì)血紅蛋白水平的影響仍然顯著（P?< 0.01)。總之，維生素 D 差向異構(gòu)體與循環(huán)血紅蛋白水平相關(guān)，這支持維生素 D 在紅細(xì)胞和鐵生理學(xué)中的作用。

介紹

除了鈣和骨代謝1 之外，維生素 D在許多生理過程中也起著重要作用，并且維生素 D 受體在整個(gè)身體的許多組織中都有表達(dá)。在循環(huán)中，維生素 D 以差向異構(gòu)和非差向異構(gòu)形式存在2。盡管這些形式的相對(duì)比例可能會(huì)影響生化分析和對(duì)維生素 D 狀態(tài)的解釋3，但其生物學(xué)功能的相似性和差異性尚不清楚。然而，已經(jīng)證明維生素 D 的差向異構(gòu)和非差向異構(gòu)形式與血清脂質(zhì)水平4和糖尿病5之間的關(guān)聯(lián)程度和方向存在差異。

關(guān)于紅細(xì)胞生成和貧血，先前的研究顯示它可以響應(yīng)維生素d給藥來改善6，7，8，其可以通過減少促炎細(xì)胞因子和鐵調(diào)素介導(dǎo)的，導(dǎo)致增加的鐵可用性9。此外，在重癥監(jiān)護(hù)病房患者中使用高劑量維生素 D 顯示可改善貧血10。維生素 D 發(fā)揮多種免疫調(diào)節(jié)功能，維生素 D 受體激活可減少促炎細(xì)胞因子11. 然而，目前尚不清楚維生素 D 對(duì)貧血影響的潛在機(jī)制是否部分由維生素 D 對(duì)炎癥的抑制作用介導(dǎo)。此外，目前尚不清楚維生素 D 的不同差向異構(gòu)形式如何影響紅細(xì)胞生成。因此，在本研究中，我們對(duì)泰國發(fā)電局 (EGAT) 的 1655 名受試者進(jìn)行了橫斷面研究，以調(diào)查維生素 D（包括其差向異構(gòu)體）對(duì)血紅蛋白水平的影響，獨(dú)立于其對(duì)循環(huán) C 的影響-反應(yīng)蛋白。

方法

研究人群

參與者 (n = 1655) 是從 2009 年 EGAT 研究 (EGAT 3) 中研究的人群的子樣本中招募的。先前報(bào)告了研究隊(duì)列的詳細(xì)信息12. 簡(jiǎn)而言之，隊(duì)列中的受試者是自愿參加健康調(diào)查的 EGAT 員工。排除標(biāo)準(zhǔn)為急性或慢性疾病，包括晚期癌癥、喪失能力的神經(jīng)或心血管疾病以及限制受試者參與研究能力或拒絕給予知情同意的精神疾病。所有受試者均完成醫(yī)學(xué)評(píng)估并接受常規(guī)實(shí)驗(yàn)室檢查調(diào)查，包括尿液分析。禁食 12 小時(shí)后抽血。總之，總共有三個(gè)EGAT隊(duì)列。1985 年，3499 名 EGAT 員工（占員工總數(shù)的一半）被隨機(jī)納入 EGAT 1 隊(duì)列。1998 年，2999 名員工被隨機(jī)納入 EGAT 2 隊(duì)列。最后，在 2009 年，招募了 2584 名參與者作為 EGAT 3 隊(duì)列。EGAT 3 于 2014 年進(jìn)行了重新調(diào)查。每次都通過電話和邀請(qǐng)函聯(lián)系同一個(gè)人參加后續(xù)檢查。否則，就已知在過渡期間死亡的人尋求有關(guān)死因的信息。在每次隨訪中，受試者接受與基線隨訪期間相似的醫(yī)學(xué)評(píng)估和相同的常規(guī)實(shí)驗(yàn)室檢查。獲得空腹血樣。一部分血液樣本被收集在抗凝血管（EDTA-K2）中用于立即進(jìn)行血液常規(guī)檢查，而其余的則被轉(zhuǎn)移到血液收集管（無添加劑）中進(jìn)行血清分離。通過離心分離血清并儲(chǔ)存在-80°C以備將來分析。瑪希隆大學(xué) Ramathibodi 醫(yī)院醫(yī)學(xué)院與人類受試者研究相關(guān)的人權(quán)委員會(huì)，批準(zhǔn)了這項(xiàng)研究，并且它符合赫爾辛基宣言（2013 年 10 月在巴西福塔雷薩修訂）的規(guī)定。所有參與者在參與研究之前都提供了書面知情同意書。

血清維生素 D 水平的測(cè)量（如前所述13）

使用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析25(OH)D 2、25(OH)D 3、3'-epi-25(OH)D 2和 3'-epi-25(OH)D 3 的血清水平. 使用 Agilent 1260 Infinity 液相色譜儀（Agilent Technologies，Waldbronn，德國），與使用 MassChrom ®的 QTRAP ® 5500 串聯(lián)質(zhì)譜儀（AB SCIEX，Framingham，MA，美國）聯(lián)用具有 3'-epi-25-OH-D3/D2 升級(jí)的 25-OH-D3/D2 血清/血漿診斷試劑盒（Chromsystems，慕尼黑，德國）。在正模式下操作的大氣壓化學(xué)電離源用于電離目標(biāo)化合物。使用Analyst Software, Version 1.6.2 (Applied Biosystems, USA)收集和分析數(shù)據(jù)。所有校準(zhǔn)品（Chromsystems 3PLUS1 ® Multilevel Serum Calibrator Set 3′-epi-25-OH-D3/D2 和 25-OH-D3/D2）和血清對(duì)照（MassCheck ®本研究中使用的 3'-epi-25-OH-D3/D2 和 25-OH-D3/D2) 可追溯到美國國家標(biāo)準(zhǔn)與技術(shù)研究院 (NIST; SRM 972) 的認(rèn)證物質(zhì)和標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì) (SRM) ，蓋瑟斯堡，馬里蘭州，美國）。每批都包含一個(gè)四點(diǎn)校準(zhǔn)曲線和兩個(gè)級(jí)別的質(zhì)量控制材料。當(dāng)相關(guān)系數(shù)為 0.998 或更高時(shí)，可獲得可接受的校準(zhǔn)曲線線性。在本研究中，總血清 25(OH)D 包括 25(OH)D 3、25(OH)D 2、3'-epi-25(OH)D 2和 3'-epi-25(OH ) 的總和)D 3。以C3'-差向異構(gòu)體形式分隔，非C3'-差向異構(gòu)體為25(OH)D 2和25(OH)D 3 之和，C3'-差向異構(gòu)體為3'-epi-25(OH)之和D2和 3'-epi-25(OH)D 3。25(OH)D 3、25(OH)D 2和3'-epi-25(OH)D 3的變異系數(shù)分別為9.2、19.9和11.8。

血紅蛋白的測(cè)定

血清高敏C反應(yīng)蛋白的測(cè)定

在 BN ProSpec系統(tǒng)（Siemens Healthcare Diagnostics，Liederbach，Germany）上使用 CardioPhase ® hsCRP使用粒子增強(qiáng)免疫比濁法測(cè)量血清高敏 C 反應(yīng)蛋白( hsCRP )。根據(jù)制造商的說明，檢測(cè)下限和定量下限均等于 0.175 mg/L。

統(tǒng)計(jì)分析（如前所述4）

正態(tài)分布數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，非正態(tài)分布數(shù)據(jù)表示為中位數(shù)和范圍。相對(duì) 3'-差向異構(gòu)體貢獻(xiàn) (%) 用于將 3'-差向異構(gòu)體-25(OH)D 的量表示為總 25(OH)D（25(OH)D 和 3'- Epi-25(OH)D)。Kolmogorov-Smirnov 檢驗(yàn)用于檢驗(yàn)正態(tài)性。當(dāng)數(shù)據(jù)不服從正態(tài)分布時(shí)進(jìn)行對(duì)數(shù)變換。Mann-Whitney U 檢驗(yàn)用于比較兩個(gè)獨(dú)立組之間的差異。使用斯皮爾曼等級(jí)相關(guān)系數(shù)估計(jì)兩個(gè)參數(shù)之間的相關(guān)性。多元線性回歸模型用于評(píng)估潛在的相關(guān)因素。磷?< 0.05 被認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。所有分析均使用 Stata Statistical Software, Release 12 (StataCorp, College Station, TX, USA) 進(jìn)行。

結(jié)果

研究人群的臨床特征見表1。由于 EGAT 員工的人口結(jié)構(gòu)，大多數(shù)受試者為男性。平均年齡為 40 ± 7 歲，體重指數(shù) (BMI) 為 24 ± 4，循環(huán)總 25(OH)D 為 25 ± 7 ng/mL 總體而言，365 (22%) 名受試者維生素 D 缺乏定義為 25( OH)D < 20 ng/mL，987 (60%) 名維生素 D 不足定義為 25(OH)D ≥ 20 ng/mL 和 < 30 ng/mL，hsCRP 水平為 2.0 ± 3.6 mg/L。

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